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上海實(shí)時(shí)熒光定量PCR(Taqman探針?lè )ǎ?/span>
上海實(shí)時(shí)熒光定量PCR(Taqman探針?lè )ǎ晒舛縋CR技術(shù)是通過(guò)熒光染料或熒光標記的特異性探針,對PCR產(chǎn)物進(jìn)行標記跟蹤,實(shí)時(shí)***反應過(guò)程。
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熒光定量PCR技術(shù)是通過(guò)熒光染料或熒光標記的特異性探針,對PCR產(chǎn)物進(jìn)行標記跟蹤,實(shí)時(shí)***反應過(guò)程。隨著(zhù)PCR 反應的進(jìn)行,反應產(chǎn)物不斷累積,熒光信號強度也等比例增加。每經(jīng)過(guò)一個(gè)循環(huán),收集一次熒光強度信號,這樣就可以通過(guò)熒光強度變化監測產(chǎn)物量的變化,結合相應的軟件對產(chǎn)物進(jìn)行分析,可以得到熒光擴增曲線(xiàn),計算待測樣品初始模版的量。實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)是一次由定性技術(shù)向定量技術(shù)的飛躍,運用該項技術(shù),可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行相對定量、定量和定性分析。
上海實(shí)時(shí)熒光定量PCR(Taqman探針?lè )ǎ?/strong>
服務(wù)項目:
1.相對定量:包括RNA提取、反轉錄和擴增,采用SYBR Green I法和TaqMan探針?lè )▋煞N方式,一般采用2-ΔΔ Ct法進(jìn)行計算。每個(gè)樣本重復三次,一般情況我公司提供內參基因引物。
2.定量:需要制備標準品并建立標準曲線(xiàn),然后檢測目的樣本中的基因,比對標準曲線(xiàn)得到基因準確拷貝數。
技術(shù)優(yōu)勢
1. 使用定量PCR儀中穩定和常用的ABI7900HT、ABI stepone /plus、Roche 480。
2. 核心試劑采用美國*KAPA試劑,實(shí)驗結果準確,重復性好。
3. 豐富的qPCR經(jīng)驗,基因類(lèi)別有DNA、mRNA、miRNA;物種類(lèi)別有人、鼠、雞、牧草、酵母菌、金黃色葡萄菌、病毒上清液等等。
送樣要求:
細胞(≥106 )、組織(≥300mg)、血液(≥1ml)、葉片(≥100mg)等樣品材料,基因組DNA或總RNA(體積≥30μl,濃度≥50 ng/μl)。
提交結果:
引物和探針及序列,反轉錄膠圖,原始數據(包括擴增曲線(xiàn)和熔解曲線(xiàn))、數據分析結果及實(shí)驗報告。