細胞增殖到底用MTT還是CCK8呢？

MTT增殖曲線(xiàn)，基本上就是基礎的功能實(shí)驗了，養過(guò)細胞的你應該都會(huì )做。

但是，要怎么樣才能省時(shí)省力呢？你也知道，如果用MTT的話(huà)，加入10ul的MTT后要等四個(gè)小時(shí)，在活細胞的線(xiàn)粒體中形成甲囋，然后在把培養基吸掉，再加上DMSO溶解，進(jìn)行檢測。

這個(gè)方法是常用的MTT方法，但是會(huì )有三個(gè)問(wèn)題，*個(gè)是有的甲囋不容易溶解。

還有一個(gè)問(wèn)題就是，由于要讓DMSO充分溶解甲囋，所以會(huì )要混勻，就會(huì )產(chǎn)生泡沫，影響酶標儀讀值：

第三個(gè)問(wèn)題，就是在吸去培養基的時(shí)候，容易把甲囋也吸走，導致終讀值不準。

當然也不是沒(méi)有辦法的，這篇文獻中提到在DMSO中加入8到800mM的氨的堿性DMSO能更快更好地溶解甲囋：

當然，這個(gè)也是有人親測可用的。不過(guò)，我們還是來(lái)談?wù)劻硪环N溶劑哈，就是傳說(shuō)中的三聯(lián)液，這個(gè)其實(shí)是1983年Mosmann大神*次發(fā)明MTT法時(shí)所采用的溶解液：

初的版本是酸化異丙醇，也就是加入了0.04N的鹽酸的異丙醇。但是后來(lái)又衍生成為了：SDS10g，異丁醇5ml，0.1ml的10M HCl，用雙蒸水溶解配成100ml溶液，這就是三聯(lián)液。

三聯(lián)液的優(yōu)點(diǎn)在于不用吸去培養基，當然，缺點(diǎn)就是要溶解很久。不過(guò)加完三聯(lián)液后可以過(guò)夜，第二天再測。

還有一種檢測方法也很常見(jiàn)，就是CCK8，和MTT的區別就在于……貴。比如MTT要5分錢(qián)，CCK8差不多就5毛……還有一點(diǎn)就是，CCK8會(huì )形成水溶性的橙色甲囋，MTT形成的是紫色的有機溶劑溶解的甲囋。

所以CCK8加入后，就直接等4小時(shí)左右，讓橙色甲囋溶解到培養基就能檢測了。而MTT，就需要用DMSO再溶解出來(lái)……