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實(shí)驗技術(shù)服務(wù)
動(dòng)物模型構建
大鼠痛風(fēng)模型
上海申知心致力于臨床前藥效學(xué)CRO實(shí)驗,多年的大鼠痛風(fēng)模型的構建,為廣大藥效學(xué)實(shí)驗提供保障??砷_(kāi)展大鼠痛風(fēng)模型的構建。
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相關(guān)文章大鼠痛風(fēng)模型實(shí)驗服務(wù)介紹:
造模方法:
尿酸鈉結晶制備:
194 mL蒸餾水加6 mL NaOH,煮沸加l g尿酸,用Dilute Hydrochloric Acid調pH 7.2,攪拌冷卻,4℃冰箱保存24 h,去上清液,用濾紙將沉淀物水分吸干,放入干燥箱70℃烘2 h,取出,刮下粉末,放人研缽內研成細末,用孔徑250μm的金屬網(wǎng)篩,過(guò)篩,裝瓶備用。用時(shí)取250 mg尿酸鈉結晶加45 mL 0.9%氯化鈉注射溶液,再加5ml吐溫80,加熱攪拌,配成50 mL尿酸鈉溶液。
除正常組外,每實(shí)驗鼠均選右踝關(guān)節外側后方為穿刺點(diǎn),針口斜面朝前上方與脛骨成45°夾角穿入踝關(guān)節腔,以4號針頭向關(guān)節腔注入0.2 mL尿酸鈉溶液,以關(guān)節囊對側鼓起為注入標準,誘導痛風(fēng)模型。各組大鼠在造模前、造模后3 h,及用藥后5 d(即造模后120 h)分別在受試踝關(guān)節相同部位,用游標卡尺測量其直徑,觀(guān)察造模前后及用藥治療后各組受試關(guān)節直徑變化,于末次給藥后2 h處死大鼠,腹主動(dòng)脈取血,2500 r/min,離心5 min,取血清測定尿酸值,進(jìn)行組間差異性比較。同時(shí)各實(shí)驗大鼠抽取關(guān)節液涂片鏡檢,將整個(gè)炎癥關(guān)節以甲醛固定24 h,再轉至做病理檢查。
模型組足趾有明顯腫脹,血尿酸水平升高;正常對照組足趾無(wú)明顯紅腫等異常改變。
為12~14mm,打結后可見(jiàn)左室前壁及心尖部顏色變暗、搏動(dòng)減弱。結扎滿(mǎn)意后用0號絲線(xiàn)關(guān)閉胸腔,生理鹽水沖洗確認閉合完好,然后依次縫合肌肉及皮膚。術(shù)后單籠飼養,肌注PG預防感染。
分子實(shí)驗平臺:高效運作了qRT-PCR、Western blot、雙向電泳技術(shù)、分子克隆與質(zhì)粒構建、流式細胞儀檢測、免疫共沉淀、染色質(zhì)免疫共沉淀、RNA免疫沉淀、凝膠電泳遷移實(shí)驗、酶聯(lián)免疫吸附測定、外泌體抽提及鑒定等實(shí)驗。
基因組學(xué)平臺:可以完成甲基化檢測、基因芯片分析、高通量測序等實(shí)驗。
蛋白組學(xué)平臺:能實(shí)現LC-MS、ITRAQ、蛋白質(zhì)修飾分析等重點(diǎn)實(shí)驗項目。
病理學(xué)平臺:涉及免疫熒光染色、免疫組織化學(xué)染色、HE染色、特殊染色等實(shí)驗。
臨床前CRO服務(wù):主要提供呼吸系統、神經(jīng)系統、免疫系統性疾病的藥效學(xué)評價(jià)服務(wù),包括靶點(diǎn)驗證、體內外模型的構建、藥物篩選、藥物分析、藥效性評價(jià)、藥代
動(dòng)力學(xué)和藥理學(xué)研究以及院內制劑研發(fā)等。
項目轉化服務(wù):助力客戶(hù)進(jìn)行方案設計、聯(lián)合課題申報、藥物項目引進(jìn)和孵化,解決客戶(hù)對實(shí)驗技術(shù)平臺、專(zhuān)業(yè)人和融資的需求。