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實(shí)驗技術(shù)服務(wù)
動(dòng)物模型構建
大鼠陰虛動(dòng)風(fēng)模型
上海申知心致力于臨床前藥效學(xué)CRO實(shí)驗,多年的藥效學(xué)陰虛動(dòng)風(fēng)模型的構建,為廣大藥效學(xué)實(shí)驗提供保障??砷_(kāi)展大小鼠藥效學(xué)陰虛動(dòng)風(fēng)模型的構建。
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相關(guān)文章大鼠陰虛動(dòng)風(fēng)模型實(shí)驗服務(wù)介紹:
建模方法:
3﹪Pelltobarbitalum Natricum 50 mg/kg腹腔注射麻醉。然后將大鼠固定于腦立體定位儀上,頭部去毛,常規消毒。無(wú)菌條件下,沿正中線(xiàn)切開(kāi)大鼠顱頂皮膚,剝離骨膜,暴露前囟。以前囟為準,根據包新民[10]等著(zhù)大鼠腦立體定位圖譜,確定右側黑質(zhì)二坐標:
①前囟后5.2 mm,正中線(xiàn)右側1.0 mm,硬膜下9.0 mm。
②前囟后5.2 mm,正中線(xiàn)右側2.5 mm,硬膜下8.5 mm。
手術(shù)要求部位小心鉆開(kāi)顱骨,用5 μL微量進(jìn)樣器將6-OHDA(溶于含0.2﹪維C的生理鹽水中,即秤量藥品抗壞血酸0.001 g,溶于生理鹽水0.5 mL中)注入右側黑質(zhì)部(以1.0 mm/min速度緩慢進(jìn)針),每孔3 μL,注射速度為1 μL/min,注射完畢后留針5 min,然后以1.0 mm/min速度緩慢退針。手術(shù)完成后,用醫用明膠海綿填塞顱骨孔,縫合切口皮膚,肌肉注射霉素7天,待動(dòng)物清醒后放回飼養籠中飼養。假手術(shù)組只注射0.2﹪維C的生理鹽水,正常對照組只捆綁動(dòng)物,不作任何處理。10 d后,以腹腔注射APO 0.5 mg/kg誘發(fā)大鼠向一側旋轉,記錄開(kāi)始旋轉至30 min內的旋轉圈數,以旋轉圈數平均>7次/min者為合格的PD模型。
將成功PD模型大鼠給予腹腔注射L-dopa + 芐絲肼(50 mg/kg L-dopa和12.5 mg/kg芐絲肼,即L-dopa和芐絲肼溶于含0.05%的乙醇和0.1﹪的抗壞血酸的注射用水中,配成10 mg/mL),每日兩次,連續2周。正常對照組、假手術(shù)組給予腹腔注射等量的含0.05%的乙醇和0.1%的抗壞血酸的注射用水,每日兩次,連續2周。2周后誘發(fā)動(dòng)物,具有典型AIM(AIM評分大于20分)表現,且APO誘導大鼠對側旋轉圈數增加者,為陰虛動(dòng)風(fēng)證LID模型。
分子實(shí)驗平臺:高效運作了qRT-PCR、Western blot、雙向電泳技術(shù)、分子克隆與質(zhì)粒構建、流式細胞儀檢測、免疫共沉淀、染色質(zhì)免疫共沉淀、RNA免疫沉淀、凝膠電泳遷移實(shí)驗、酶聯(lián)免疫吸附測定、外泌體抽提及鑒定等實(shí)驗。
基因組學(xué)平臺:可以完成甲基化檢測、基因芯片分析、高通量測序等實(shí)驗。
蛋白組學(xué)平臺:能實(shí)現LC-MS、ITRAQ、蛋白質(zhì)修飾分析等重點(diǎn)實(shí)驗項目。
病理學(xué)平臺:涉及免疫熒光染色、免疫組織化學(xué)染色、HE染色、特殊染色等實(shí)驗。
臨床前CRO服務(wù):主要提供呼吸系統、神經(jīng)系統、免疫系統性疾病的藥效學(xué)評價(jià)服務(wù),包括靶點(diǎn)驗證、體內外模型的構建、藥物篩選、藥物分析、藥效性評價(jià)、藥代
動(dòng)力學(xué)和藥理學(xué)研究以及院內制劑研發(fā)等。
項目轉化服務(wù):助力客戶(hù)進(jìn)行方案設計、聯(lián)合課題申報、藥物項目引進(jìn)和孵化,解決客戶(hù)對實(shí)驗技術(shù)平臺、專(zhuān)業(yè)人和融資的需求。