子宮內膜異位癥模型

子宮內膜異位癥模型實(shí)驗介紹：

常用動(dòng)物：大鼠，小鼠，性成熟，8-10周齡

適應性飼養后，用消毒棉拭子旋轉插入小鼠陰道內，并在陰道內輕輕轉動(dòng)幾下后取出，涂于載玻片上，用95%酒精固定30min后晾干。涂片進(jìn)行HE染色或瑞士染色，觀(guān)察動(dòng)情周期。連續觀(guān)察2周，每日定時(shí)進(jìn)行陰道涂片檢查，觀(guān)察動(dòng)情周期。選擇連續有2個(gè)或2個(gè)以上正常動(dòng)情周期（陰道涂片為大量無(wú)核角化細胞的大鼠），造模前一天每鼠肌注雌二醇0.1mg/(kg.d，大鼠)，使動(dòng)物統一處于動(dòng)情期。

建模方法I：

大鼠：腹腔注射麻醉后，將大鼠固定，腹部剪毛，消毒，并在無(wú)菌條件下開(kāi)腹。在尿道口上約1cm處做垂直正中縱切口長(cháng)約2-3cm進(jìn)腹。大鼠子宮呈Y型，分離左側子宮，近端離左子宮角1cm處結扎，遠端離卵巢2cm處結扎，并結扎兩端間的子宮系膜血管，切除長(cháng)約1.5-2.0cm的子宮段，立即放入盛有生理鹽水的培養皿中，修剪去子宮漿膜外的脂肪組織，縱向切開(kāi)子宮腔，剝去漿膜層及肌層，將子宮內膜片剪成5mm×5mm大小，移植到腹壁血管豐富處，注意其內膜面與皮下組織貼合。逐層縫合傷口，待老鼠自然蘇醒后常規飼養。術(shù)后每天注射，共3天。

建模4周后，開(kāi)腹檢查所有造模大鼠移植的子宮內膜是否生長(cháng)。若見(jiàn)移植物體積增大，形成表面被覆結締組織并有血管形成、內有液體積聚的透明小囊泡，則證明造模成功。

建模方法II：

小鼠：動(dòng)情期C57BL/6小鼠，脫頸椎法處死，仰臥位固定，腹部酒精消毒后，鋪上無(wú)菌治療洞巾，戴無(wú)菌手套，在恥骨聯(lián)合上方0.5cm處，沿正中線(xiàn)剖開(kāi)腹腔。找到Y形子宮，小心分別牽出左、右側子宮，細心分離雙側子宮系膜。離斷宮角與卵巢，在Y形子宮分叉分別剪斷左側及右側子宮，放入裝有10mL37℃生理鹽水的無(wú)菌彎盤(pán)中，反復漂洗子宮表面的血跡，進(jìn)一步分離剩余粘附的子宮系膜。將兩個(gè)子宮角分別放置于兩個(gè)無(wú)菌彎盤(pán)中，將它們直接剪成大小約1mm3的大小均等的碎片，并將它們懸浮于37℃生理鹽水中。將捐贈鼠的子宮按1:2的比例接種于受鼠腹腔，用0.3mL生理鹽水懸浮彎盤(pán)里的組織碎片。

隨機取動(dòng)情期C57BL/6小鼠，取臍下0.5cm偏正中線(xiàn)0.5cm處的左下腹為進(jìn)針點(diǎn)，將溶有子宮組織碎片的0.3mL生理鹽水用20號針頭連同子宮組織快碎片注入接受鼠的腹腔，后放置于鼠籠。直至第9天。隨機取動(dòng)物，處死后，取異位內膜，進(jìn)行冰凍切片制備，HE染色觀(guān)察異位內膜病灶是否有典型的內膜腺體及間質(zhì)，提示復制動(dòng)物模型是否成功。

分子實(shí)驗平臺：高效運作了qRT-PCR、Western blot、雙向電泳技術(shù)、分子克隆與質(zhì)粒構建、流式細胞儀檢測、免疫共沉淀、染色質(zhì)免疫共沉淀、RNA免疫沉淀、凝膠電泳遷移實(shí)驗、酶聯(lián)免疫吸附測定、外泌體抽提及鑒定等實(shí)驗。

基因組學(xué)平臺：可以完成甲基化檢測、基因芯片分析、高通量測序等實(shí)驗。

蛋白組學(xué)平臺：能實(shí)現LC-MS、ITRAQ、蛋白質(zhì)修飾分析等重點(diǎn)實(shí)驗項目。

病理學(xué)平臺：涉及免疫熒光染色、免疫組織化學(xué)染色、HE染色、特殊染色等實(shí)驗。

臨床前CRO服務(wù)：主要提供呼吸系統、神經(jīng)系統、免疫系統性疾病的藥效學(xué)評價(jià)服務(wù)，包括靶點(diǎn)驗證、體內外模型的構建、藥物篩選、藥物分析、藥效性評價(jià)、藥代

動(dòng)力學(xué)和藥理學(xué)研究以及院內制劑研發(fā)等。

項目轉化服務(wù)：助力客戶(hù)進(jìn)行方案設計、聯(lián)合課題申報、藥物項目引進(jìn)和孵化，解決客戶(hù)對實(shí)驗技術(shù)平臺、專(zhuān)業(yè)人和融資的需求。