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實(shí)驗技術(shù)服務(wù)
動(dòng)物模型構建
動(dòng)物股骨頭壞死模型
上海申知心致力于臨床前藥效學(xué)CRO實(shí)驗,多年的藥效學(xué)股骨頭壞死模型的構建,為廣大藥效學(xué)實(shí)驗提供保障??砷_(kāi)展大小鼠藥效學(xué)股骨頭壞死模型的構建。
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常用動(dòng)物:兔/大鼠(下文以大鼠創(chuàng )傷的操作方法為例)
給予腹腔注射麻醉后術(shù)區脫毛,清洗備皮后碘伏消毒,鋪無(wú)菌巾單,以大轉子處為中心,取右髖部外側切口,長(cháng)約3cm,分離皮下組織,鈍性沿肌纖維方向分離臀大肌,牽開(kāi)肌肉,切開(kāi)髖關(guān)節囊顯露股骨頭,將髖關(guān)節脫位,切斷圓韌帶,鈍性剝離股骨頸近端骨膜組織,將髖關(guān)節復位,保護坐骨神經(jīng)并保持髖關(guān)節深層肌肉完整以避免術(shù)后髖關(guān)節脫位。等滲鹽水沖洗創(chuàng )面,分層關(guān)閉傷口。假手術(shù)組采用同樣方法麻醉,在切開(kāi)皮膚、鈍性分離臀大肌后,等滲鹽水沖洗創(chuàng )面,分層關(guān)閉傷口。術(shù)后麻醉蘇醒后均正常飲食及活動(dòng)。
非創(chuàng )傷性股骨頭壞死:經(jīng)耳緣靜脈注射,間隔2周,注射馬血清各1次。間隔2周后腹腔注射3次(每間隔3d注射1次)期間肌肉注射抗感染。注射激素5周后,處死模型組兔,觀(guān)察造模情況。
耳緣靜脈注射大腸桿菌內毒素兩次,注射間隔為24h。第二次注射毒素后,臀肌注射3次,每次注射間隔為24h。注射4周后,進(jìn)行治療(如BMSCs)。
取俯臥位,腹腔麻醉后,無(wú)菌術(shù)下經(jīng)后側入路,切開(kāi)關(guān)節囊暴露股骨頭但不脫位,用蘸有液氮的棉球連續冷凍股骨頭8次,共約3分鐘,自然復溫后,于股骨頸后上方近關(guān)節緣處的骨皮質(zhì),用直徑為3.5mm鉆頭從股骨頸內后側向股骨頭內鉆入4mm,到達冷凍關(guān)節面軟骨下。
分子實(shí)驗平臺:高效運作了qRT-PCR、Western blot、雙向電泳技術(shù)、分子克隆與質(zhì)粒構建、流式細胞儀檢測、免疫共沉淀、染色質(zhì)免疫共沉淀、RNA免疫沉淀、凝膠電泳遷移實(shí)驗、酶聯(lián)免疫吸附測定、外泌體抽提及鑒定等實(shí)驗。
基因組學(xué)平臺:可以完成甲基化檢測、基因芯片分析、高通量測序等實(shí)驗。
蛋白組學(xué)平臺:能實(shí)現LC-MS、ITRAQ、蛋白質(zhì)修飾分析等重點(diǎn)實(shí)驗項目。
病理學(xué)平臺:涉及免疫熒光染色、免疫組織化學(xué)染色、HE染色、特殊染色等實(shí)驗。
臨床前CRO服務(wù):主要提供呼吸系統、神經(jīng)系統、免疫系統性疾病的藥效學(xué)評價(jià)服務(wù),包括靶點(diǎn)驗證、體內外模型的構建、藥物篩選、藥物分析、藥效性評價(jià)、藥代
動(dòng)力學(xué)和藥理學(xué)研究以及院內制劑研發(fā)等。
項目轉化服務(wù):助力客戶(hù)進(jìn)行方案設計、聯(lián)合課題申報、藥物項目引進(jìn)和孵化,解決客戶(hù)對實(shí)驗技術(shù)平臺、專(zhuān)業(yè)人和融資的需求。