技術(shù)文章
Technical articles(1)復制方法 將D-半乳糖用生理鹽水配制成50%注射液,常規滅菌后待用;復方托品酰胺滴眼劑供鏡檢前擴瞳用。用3周齡體重25g左右大鼠,經(jīng)復方托品酰胺滴眼劑散瞳后,裂隙燈檢查晶狀體透明。造模大鼠均采用常規消毒,然后于頸背部每日經(jīng)皮下按30ml/kg體重的劑量注射50%半乳糖,每天1次,連續30d。于次注射后第7, 14, 21, 30日分別以復方托品酰胺滴眼劑散瞳后用裂隙燈觀(guān)察晶狀體的動(dòng)態(tài)變化。
(2)模型特點(diǎn) 注射D-半乳糖7d后,大鼠開(kāi)始出現白內障早期改變,即晶狀體周邊皮質(zhì)出現空泡;給藥14d、21d及30d后大鼠均出現不同程度的晶狀體渾濁。經(jīng)皮下注射 D-半乳糖建立的白內障動(dòng)物模型復制成功率高,模型復制成功率高,造模時(shí)間較短,實(shí)驗操作簡(jiǎn)單,實(shí)驗經(jīng)費耗費較少,本模型為進(jìn)一步研究白內障發(fā)病機制、療效觀(guān)察以及相關(guān)藥物的篩選提供了較為理想的實(shí)驗平臺。
(3)比較醫學(xué) 應用D-半乳糖誘導而復制的白內障動(dòng)物模型,其白內障形成的病理過(guò)程與臨床上人類(lèi)糖尿病性白內障和老年性白內障相似,是目前得到*的一種較為理想的動(dòng)物模型,已廣泛應用于糖尿病性白內障、老年性白內障的發(fā)病機制及藥物治療方面的研究。但采用本方法制作的動(dòng)物模型對大鼠年齡、半乳糖誘導途徑、半乳糖的使用劑量要求較高。除了采用皮下注射方法外,也有研究采用在建立半乳糖性白內障模型過(guò)程中,用含半乳糖膳食喂養動(dòng)物或給予動(dòng)物飲糖水來(lái)復制動(dòng)物模型,但此方法使大鼠白內障病變出現時(shí)間延緩,病情減輕,較為符合人類(lèi)老年性白內障的發(fā)病規律,適用于進(jìn)行白內障藥物治療方面的研究;或者通過(guò)動(dòng)物腹腔注射半乳糖使口服半乳糖誘發(fā)白內障病變的成熟時(shí)間提早,適用于作白內障時(shí)混濁晶體測定方面的研究;此外尚有用球后注射半乳糖的方法來(lái)制作大鼠晶體混濁,但由于制作技術(shù)難度較高易造成眼部感染等缺陷,實(shí)用性較差。目前國內文獻半乳糖性白內障動(dòng)物模型大多數采用腹腔注射方法,但研究發(fā)現腹腔注射D-半乳糖的3周齡幼鼠極易死亡,所以模型復制的成功率較低。其原因可能為腹腔注射時(shí),注射針的針尖易傷及幼鼠臟器造成大鼠死亡;也可能與腹膜吸收半乳糖較快,使組織細胞處于高滲環(huán)境,引起組織細胞功能障礙從而導致動(dòng)物死亡。因此,用皮下注射方法造模則可避免或減少動(dòng)物傷亡,提高模型動(dòng)物的存活率,模型復制成功率高。實(shí)踐中采用何種大鼠年齡的大鼠、糖劑量及誘導途徑應根據實(shí)驗需要而定,因為這些因素將直接關(guān)系到動(dòng)物模型復制的成敗及應用。