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ELISA試劑盒空白孔的設置

更新時(shí)間:2017-11-13點(diǎn)擊次數:3180
  ELISA試劑盒空白孔的設置,我們做elisa實(shí)驗就是為了各種步驟都詳細,享受做elisa實(shí)驗的過(guò)程,做出來(lái)的elisa實(shí)驗結果是一種成就感,那么elisa試劑盒空白孔如何設置呢?

ELISA試劑盒

  ELISA試劑盒ELISA空白對照有幾種:
  1.空氣空白水空白:一般是用于儀器調零的,孔數值減掉該孔數值。
  2.底物空白:一般是用于防止底物弱顯色所造成的讀數偏高,同樣孔數值減掉該孔數值(只加底物和終止液)
  3.酶空白:一般在2步法實(shí)驗中使用,主要是看酶是否和板有非特異性結合的,一般不做這個(gè)。
  ELISA空白孔一般設一個(gè),這是為了減除顯色液的OD值。而陰性和陽(yáng)性標準品好是設2個(gè)復孔,雖然有點(diǎn)浪費,但為了實(shí)驗的可靠性,我認為還是很有的。ELISA空白孔加什么?一般兩個(gè)做法,看個(gè)人習慣或者說(shuō)看你們實(shí)驗室的習慣:
  1,什么都不加,然后那個(gè)孔按照操作流程來(lái)做,這個(gè)說(shuō)法的根據就是空白,也就是什么都沒(méi)有。
  2,加樣本稀釋液,然后按照操作流程來(lái)做。這個(gè)做法的根據就是只要不含陽(yáng)性物質(zhì)就算是空白的,加入樣本稀釋液的目的是為了使這個(gè)孔除了在沒(méi)有陽(yáng)性物質(zhì)上其他的都與其他孔一致。
  怎麼控制顯色時(shí)間?
  顯色時(shí)間要通過(guò)預實(shí)驗找到所測sample的顯色OD在0.1到2.0的有效range間,我用過(guò)OPDsolution,一般incubationfor15minatRT,測一次然后立即加入stopsolution在測一次。