Elisa試劑盒試驗過(guò)程中需要特別注意的細節

　　Elisa試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗（ELISA）、已知濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進(jìn)行檢測。先將生物素標記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后，加入親和素標記過(guò)的HRP。再經(jīng)過(guò)溫育和洗滌，去除未結合的酶結合物，然后加入底物A、B，和酶結合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中的濃度呈比例關(guān)系。
      Elisa試劑盒試驗過(guò)程中需要特別注意的細節
　　1、試劑準備：試劑都在使用前達到室溫，使用后請立即按照說(shuō)明書(shū)要求保存。實(shí)驗操作中使用一次性吸頭，避免交叉污染；
　　2．加樣：加樣時(shí)，要控制加樣速度，避免*孔與后一孔之見(jiàn)的時(shí)間間隔過(guò)大，否則將會(huì )導致不同的預孵育時(shí)間，從而影響實(shí)驗的準確性以及重復性；一般加樣時(shí)間控制在10分鐘內，如果樣本數量過(guò)多，可使用多道移液器；
　　3、建議實(shí)驗前預測樣品含量，如樣品濃度過(guò)高，應對樣品進(jìn)行稀釋?zhuān)嬎憬Y果時(shí)乘以相應的稀釋倍數；
　　4、洗滌：洗滌過(guò)程中反應孔中的殘留的洗滌液應在濾紙上充分拍干，同時(shí)要消除板底殘留的液體和手指痕跡，避免影響后的酶標儀讀數；
　　5、反應時(shí)間的控制：加入底物后請定時(shí)觀(guān)察反應孔的顏色變化（比如，10分鐘左右），如果顏色較深，請提前加入終止液終止反應；
　　6、孵育：樣品要在密閉的容器內進(jìn)行孵育，嚴格按照說(shuō)明書(shū)上規定的孵育時(shí)間和溫度進(jìn)行；
　　7、建議使用本試劑盒時(shí)先做預實(shí)驗（即先做標準曲線(xiàn)，試用幾個(gè)標本），如果對本試劑盒有疑問(wèn)，可與廠(chǎng)家咨詢(xún)
　　Elisa試劑盒是免疫診斷中的一項新技術(shù)，現已成功地應用于多種病原微生物所引起的傳染病、寄生蟲(chóng)病及非傳染病等方面的免疫診斷。也已應用于大分子抗原和小分子抗原的定量測定，根據已經(jīng)使用的結果，認為ELISA法具有靈敏、特異、簡(jiǎn)單、快速、穩定及易于自動(dòng)化操作等特點(diǎn)。不僅適用于臨床標本的檢查，而且由于一天之內可以檢查幾百甚至上千份標本,因此，也適合于血清流行病學(xué)調查。本法不僅可以用來(lái)測定抗體，而且也可用于測定體液中的循環(huán)抗原，所以也是一種早期診斷的良好方法。因此ELISA法在生物醫學(xué)各領(lǐng)域的應用范圍日益擴大。